🧬 THM / Trihalometany w wodzie

Fizykochemia PN-EN ISO 10301

Krótko: o co chodzi

Oznaczanie trihalometanów (chloroform, bromodichlorometan, dibromochlorometan, bromoform) w wodzie metodą chromatografii gazowej z detekcją ECD lub MS. Badanie wykonuje się według normy PN-EN ISO 10301:2002; Zakres liniowy: 0,5–200 µg/L (typowo). Procedura obejmuje 11 kroków (łącznie około 4 h 55 min–5 h 55 min); stosuje się je m.in. do: Kontrola jakości wody pitnej (suma THM ≤100 µg/L), Monitoring ubocznych produktów dezynfekcji chlorowej, Optymalizacja procesu chlorowania (minimalizacja THM).

W skrócie

  • Norma: PN-EN ISO 10301:2002
  • Kategoria: Fizykochemia
  • Kroków procedury: 11
  • Łączny czas etapów: 4 h 55 min–5 h 55 min
  • Oznaczane związki: CHCl₃, CHBrCl₂, CHBr₂Cl, CHBr₃ (4 THM)
  • Granica wykrywalności (headspace-GC-ECD): 0,1–0,5 µg/L
  • Granica wykrywalności (purge & trap GC-MS): 0,01–0,05 µg/L

Przegląd

Trihalometany (THM) to grupa ubocznych produktów dezynfekcji (DBP) powstających podczas chlorowania wody pitnej. Chlor reaguje z naturalną materią organiczną (kwasy humusowe, fulwowe) obecną w wodzie surowej, tworząc lotne związki chlorowcoorganiczne. Cztery główne THM to: chloroform (CHCl₃), bromodichlorometan (CHBrCl₂), dibromochlorometan (CHBr₂Cl) i bromoform (CHBr₃). Suma tych czterech związków (TTHM — Total Trihalomethanes) jest regulowana prawnie.

Dopuszczalna wartość sumy THM w wodzie pitnej wynosi 100 µg/L (wg Dyrektywy UE 2020/2184 i Rozporządzenia MZ). Chloroform jest zazwyczaj dominującym składnikiem (60–90% TTHM). Trihalometany wykazują działanie rakotwórcze (chloroform — grupa 2B wg IARC), mutagenne i hepatotoksyczne. Długotrwała ekspozycja na THM w wodzie pitnej wiąże się ze zwiększonym ryzykiem raka pęcherza moczowego.

Norma PN-EN ISO 10301 opisuje metody chromatografii gazowej do oznaczania lotnych związków chlorowcoorganicznych w wodzie, w tym THM. Stosuje się dwie techniki wprowadzania próbki: ekstrakcję ciecz-ciecz (LLE) z pentanem lub heksanem, następnie GC-ECD, oraz analizę fazy nadpowierzchniowej (headspace) — statyczną lub dynamiczną (purge & trap), następnie GC-ECD lub GC-MS. Detektor wychwytu elektronów (ECD) jest szczególnie czuły na związki chlorowcoorganiczne.

Technika headspace-GC jest najczęściej stosowana ze względu na prostotę, automatyzację i brak konieczności używania rozpuszczalników organicznych. Purge & trap oferuje najniższe granice wykrywalności (rzędu ng/L), ale jest bardziej czasochłonna.

Zasada metody

Lotne THM są wydzielane z próbki wody do fazy gazowej — metodą headspace (ogrzewanie próbki w zamkniętej fiolce, równowaga ciecz-gaz) lub purge & trap (przedmuchiwanie gazem obojętnym, sorpcja na pułapce, desorpcja termiczna). Faza gazowa jest wprowadzana do chromatografu gazowego (GC), gdzie THM są rozdzielane na kolumnie kapilarnej (np. DB-624, RTX-VRX) w programie temperaturowym. Detekcja odbywa się za pomocą detektora wychwytu elektronów (ECD) — wysoce selektywnego i czułego na związki halogenowe — lub detektora masowego (MS) zapewniającego identyfikację na podstawie widma masowego. Stężenia oznacza się z krzywej kalibracyjnej.

Zastosowania

Kluczowe parametry

ParametrWartość
Oznaczane związkiCHCl₃, CHBrCl₂, CHBr₂Cl, CHBr₃ (4 THM)
Granica wykrywalności (headspace-GC-ECD)0,1–0,5 µg/L
Granica wykrywalności (purge & trap GC-MS)0,01–0,05 µg/L
Zakres liniowy0,5–200 µg/L (typowo)
Dopuszczalna suma THM (woda pitna)≤100 µg/L
DetektorECD (63Ni) lub MS (kwadrupol/pułapka jonowa)

Norma

Numer normy
PN-EN ISO 10301:2002
Tytuł (PL)
Jakość wody — Oznaczanie wysoce lotnych związków chlorowcoorganicznych (LZWO) — Metody chromatografii gazowej
Title (EN)
Water quality — Determination of highly volatile halogenated hydrocarbons — Gas chromatographic methods

Procedura krok po kroku

  1. Pobór próbki

    Napełnij fiolkę 40 mL bez bąbelków powietrza (THM lotne!). Dodaj Na₂S₂O₃ (3 mg) przed poborem do usunięcia Cl₂. Szczelnie zamknij. Przechowuj w 4°C, analiza w 14 dni.

    ⏱ Czas: 5 min • 🌡 Temperatura: 4°C

  2. Przygotowanie wzorców kalibracyjnych

    Przygotuj serię 0, 5, 10, 25, 50, 100 µg/L TTHM w wodzie wolnej od THM. Dodaj wzorzec wewnętrzny (IS). Dodaj NaCl (3 g/10 mL).

    ⏱ Czas: 20 min

  3. Przygotowanie fiolek headspace

    Do fiolki 20 mL wprowadź 10 mL próbki, dodaj NaCl (3 g) i 10 µL IS. Zamknij kapslem z septą PTFE/silikon. Nie zostawiaj bąbelków!

    ⏱ Czas: 5 min/próbkę

  4. Ustawienie autosamplera headspace

    Temperatura termostatowania: 60–80°C, czas termostatowania: 20–30 min, temperatura linii transferowej: 150°C.

    🌡 Temperatura: 60–80°C

  5. Ustawienie GC

    Kolumna DB-624: program temp. 35°C (5 min) → 10°C/min → 200°C (2 min). Gaz nośny: He 1,0 mL/min (GC-MS) lub N₂ (GC-ECD). Injektor: 200°C, split 1:10.

    ⏱ Czas: 5 min

  6. Ustawienie detektora

    ECD: temperatura 300°C, make-up N₂ 30 mL/min. Lub MS: tryb SIM (m/z: 83, 85 dla CHCl₃; 127, 129 dla CHBrCl₂; 173 dla CHBr₂Cl; 173, 252 dla CHBr₃).

    ⏱ Czas: 5 min

  7. Kalibracja

    Zmierz serię wzorców. Wykreśl krzywą kalibracyjną (stosunek pól pików analit/IS vs stężenie). R² ≥0,998 dla każdego THM.

    ⏱ Czas: 3–4 h

  8. Pomiar próbek

    Umieść fiolki w autosamplerze. Aparat automatycznie termostatuje, dozuje i analizuje. Czas analizy ok. 50 min/próbkę (z termostatowaniem).

    ⏱ Czas: 50 min/próbkę

  9. Identyfikacja i kwantyfikacja

    Zidentyfikuj piki THM na chromatogramie (czasy retencji, widma MS). Oblicz stężenia z krzywej kalibracyjnej. Oblicz sumę THM (TTHM).

    ⏱ Czas: 10 min

  10. Kontrola jakości

    Blank metody, blank polowy, duplikat, próbka fortyfikowana (spike 50 µg/L — odzysk 80–120%), wzorzec kontrolny CRM.

    ⏱ Czas: 15 min

  11. Raportowanie

    Podaj stężenia poszczególnych THM i sumę TTHM w µg/L. Dla wyników <LOQ raportuj „<LOQ". Dołącz informację o metodzie detekcji (ECD/MS).

Wymagany sprzęt i aparatura

SprzętPrzykładOrientacyjna cena
Chromatograf gazowy z detektorem ECD lub MSShimadzu GC-2030 + ECD, Agilent 8890 GC + 5977B MS, Thermo TRACE 1310100 000–350 000 PLN
Autosampler headspaceShimadzu HS-20, Agilent 7697A, Teledyne Tekmar HT350 000–120 000 PLN
System purge & trap (opcja)Teledyne Tekmar Atomx, OI Analytical Eclipse80 000–150 000 PLN
Kolumna kapilarnaAgilent DB-624 (30 m × 0,25 mm × 1,4 µm), Restek RTX-VRX1 500–3 500 PLN
Fiolki headspace 20 mLFiolki szklane z kapslem krympowanym i septą PTFE/silikon2–5 PLN/szt.
Gaz nośny — hel lub azotHel 5.0 (dla GC-MS) lub azot 5.0 (dla GC-ECD), butla 50 L300–1 500 PLN/butla
Gaz do ECD — azot lub argon/metanAzot 5.0 (make-up gas) lub Ar/CH₄ 95/5300–600 PLN/butla

Odczynniki, podłoża i materiały eksploatacyjne

OdczynnikCASSzczegóły
Wzorce THM (mieszanina)Certyfikowana mieszanina 4 THM w metanolu, np. Supelco EPA 501/601 THM Mix, 200 µg/mL każdy; przechowywać w –18°C
Wzorzec wewnętrzny (IS)Fluorobenzen lub 1,2-dibromoetan w metanolu — do korekty odzysku i objętości dozowania
Tiosiarczan sodu7772-98-7Na₂S₂O₃ — dodawany do próbki w punkcie poboru (ok. 3 mg na 40 mL) w celu usunięcia wolnego chloru i zatrzymania reakcji tworzenia THM
Chlorek sodu7647-14-5NaCl — dodawany do fiolki headspace (ok. 3–5 g na 10 mL próbki) w celu zwiększenia efektywności wydzielania THM (efekt solny)
Metanol cz.d.a.67-56-1Do przygotowania rozcieńczeń wzorców; jakość do chromatografii
Woda wolna od THMWoda ultraczysta odgazowana lub gotowana 15 min — do przygotowania wzorców i blanków

Bezpieczeństwo i higiena pracy (BHP)

Najczęstsze pytania

Jaka norma opisuje to badanie?

Badanie wykonuje się według normy PN-EN ISO 10301:2002 — „Jakość wody — Oznaczanie wysoce lotnych związków chlorowcoorganicznych (LZWO) — Metody chromatografii gazowej”. Tytuł angielski: „Water quality — Determination of highly volatile halogenated hydrocarbons — Gas chromatographic methods”.

Na czym polega ta metoda?

Lotne THM są wydzielane z próbki wody do fazy gazowej — metodą headspace (ogrzewanie próbki w zamkniętej fiolce, równowaga ciecz-gaz) lub purge & trap (przedmuchiwanie gazem obojętnym, sorpcja na pułapce, desorpcja termiczna). Faza gazowa jest wprowadzana do chromatografu gazowego (GC), gdzie THM są rozdzielane na kolumnie kapilarnej (np.

Jaki jest zakres pomiarowy i dokładność?

Oznaczane związki: CHCl₃, CHBrCl₂, CHBr₂Cl, CHBr₃ (4 THM); Granica wykrywalności (headspace-GC-ECD): 0,1–0,5 µg/L; Granica wykrywalności (purge & trap GC-MS): 0,01–0,05 µg/L; Zakres liniowy: 0,5–200 µg/L (typowo).

Ile trwa wykonanie badania?

Suma czasów podanych przy poszczególnych etapach to około 4 h 55 min–5 h 55 min. Procedura obejmuje 11 kroków.

Jaki sprzęt jest potrzebny?

Chromatograf gazowy z detektorem ECD lub MS, Autosampler headspace, System purge & trap (opcja), Kolumna kapilarna, Fiolki headspace 20 mL, Gaz nośny — hel lub azot, Gaz do ECD — azot lub argon/metan. Orientacyjny koszt podstawowej aparatury (Chromatograf gazowy z detektorem ECD lub MS): 100 000–350 000 PLN.

Gdzie stosuje się to badanie?

Kontrola jakości wody pitnej (suma THM ≤100 µg/L); Monitoring ubocznych produktów dezynfekcji chlorowej; Optymalizacja procesu chlorowania (minimalizacja THM); Badanie wody w basenach kąpielowych (THM w wodzie i powietrzu); Kontrola jakości wody po ozonowaniu, UV i alternatywnej dezynfekcji; Monitoring wód powierzchniowych jako wskaźnik zanieczyszczenia antropogenicznego; Badanie wody butelkowanej.

Jakie środki ostrożności obowiązują?

Chloroform — rakotwórczy kat. 2, toksyczny (H351, H331, H302) — praca pod wyciągiem, rękawice, okulary; Metanol — toksyczny (H301, H311, H331), łatwopalny — praca pod wyciągiem; Wzorce THM w metanolu — przechowywać w –18°C, dawkować w wyciągu; Hel / azot — gazy pod ciśnieniem, ryzyko asfiksji w zamkniętych pomieszczeniach; Odpady zawierające THM — zbierać jako odpady chlorowcoorganiczne; Detektory ECD zawierają izotop ⁶³Ni — wymiana i utylizacja wg przepisów o źródłach promieniotwórczych.

Które laboratorium wykona to badanie?

Badanie wykonują laboratoria akredytowane według ISO/IEC 17025. Na LabCoda wyszukasz je po numerze normy PN-EN ISO 10301.

🔍 Znajdź laboratorium wykonujące to badanie